〔蘇慶華專欄〕初解靈芝孢子粉的迷思
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- 分類：臺北醫學大學 蘇慶華教授
- 建立於 2016-12-18, 週日 22:27
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靈芝孢子粉的成分雖不像子實體那麼完整，但粉末狀的特性容易服用，成了它在大陸廣受歡迎的原因之一。根據TLC圖譜分析顯示，孢子粉不含或只有很少的三萜類，但含有較高的真菌固醇（甾醇），這些成分才是孢子粉除了多醣之外的功效來源。
文／蘇慶華（臺北醫學大學微生物暨免疫學科講座教授）
◎本文原載於2015年《健康靈芝》68期 p.2～4
本文作者臺北醫學大學的蘇慶華教授，是「第一屆中國靈芝大會」的演講嘉賓。
（攝影／吳亭瑤）
2015年8月9日，跟著蘇迪勒颱風的尾巴，來到「第一屆中國靈芝大會」的主辦地浙江龍泉。龍泉位於歐江上游，是麗水市轄下的一個縣級城市，全市面積大約三千平方公里，人口不到三十萬，山明水秀，沒有工業污染，「生態指標」超優，除了以寶劍、青瓷、香菇聞名，近年來也以靈芝的培養享譽於中國大陸，靈芝子實體年產量120～150萬噸。聽到這個數字，馬上不難了解為什麼「第一屆中國靈芝大會」在此舉辦的原因了。
這次大會邀請了兩岸許多專家、學者和產業界人士參與，筆者也是受邀做專題演講的主講者之一，而我講的不是什麼新鮮事，正是已經開發十幾年的靈芝子實體創傷敷料SACCHACHITIN，希望能讓與會者了解，靈芝除了做保健食品之外，也有作為生物醫學材料的潛力。
兩岸遍栽培的「赤芝」學名該怎麼定，仍有待討論
本次大會的重頭戲之一，就是對靈芝學名的爭議。大家對目前兩岸普遍栽培的「赤芝」並不是原來歐洲所認定的Ganoderma lucidum都有共識。北京林業大學微生物所所長戴玉成教授，以及國立自然科學博物館研究員吳聲華博士，均主張以成立新種G. lingzhi來處理，但北京中國科學院微生物研究所研究員姚一健博士則認為，此菌種極有可能是1983年發表的四川靈芝（G. sichuanense）。
由於四川靈芝的模式標本以目前的技術無法取得有效的DNA片段並加以定序，為保存標本的完整性，也只能暫停現行以破壞標本取得DNA的方式，等到有一天，有更先進的DNA萃取方法發展出來，再繼續進行。
雙方無論在樣品數量、採集範圍的代表性、論述的完整性，都令人折服，也都無涉個人好惡，這是在大陸上既少見又精彩的科學性辯論。因此，赤芝學名的論證，可能還要再一段時間之後才能達到共識。
為什麼孢子粉在大陸那麼受歡迎？
參與這樣的研討會令人收穫不少，但此行的目的還想解開一個疑惑──孢子粉。首先我想提出兩個問題：究竟靈芝孢子粉的保健功能到底為何？為何大陸消費者對孢子粉的接受度遠高於子實體？
由於臺灣的栽培者並不生產靈芝孢子粉，研究者對孢子粉也就相對比較陌生。我們的實驗室偶有機會也會分析一下孢子粉的三萜類含量，會發現和子實體相比，孢子粉幾乎沒有三萜成分，因此態度上就會把它擺在一邊，不想積極研究。
然而大陸經濟改革開放之後，孢子粉成為市場上的顯學，並且成為栽培者的生產標的。根據最近的數據顯示，這樣的生產方式可以生產相當於子實體1.5倍重的孢子粉，實在令人難以想像（圖1），這也激發我們的好奇心，想要一窺究竟。
圖1 龍泉栽培基地生產靈芝孢子粉的過程
(1) 將大型太空包埋於栽培舍土壤中。
(2) 長出子實體後，套上桶狀塑膠環狀容器並加蓋，同時下面鋪上塑膠布。
(3) 待孢子釋放後打開容器。(4) 收集孢子。
（提供／蘇慶華）
受邀在本次大會做專題演講的張樹庭教授也指出，靈芝有不同的生長階段，如菌絲體、子實體和擔孢子。傳統上一般所指的靈芝應該是子實體，擔孢子是有性世代的起點，經常是單倍體，發芽成為單核菌絲，經過與不同性別的單核交配形成雙核菌絲產生子實體後，再釋出孢子。
這些孢子是否攜帶與子實體相同的成分，還是有不一樣的特殊成分？孢子粉受到大陸消費者歡迎的原因，除了可能來自銷售業者的炒作之外，我認為應該還有它的功效成分在支撐，否則這種炒作是不會持久的，因此趁著參加此會議，我就到龍泉生產地實地採集樣本回來分析。
TLC圖譜分析顯示，孢子粉幾無三萜，但有固醇（甾醇）
分析靈芝的方法有很多，通常我會先用薄層色層分析法（thin-layer chromatography, TLC），一方面可以快速簡單地進行定性，另一方面TLC可以提供目視的主要成分的指紋，作為樣品生產方法、原料區別之參考。當然，若要進一步做成分定量，則需要其他方法配合。本文就先以TLC圖譜來說明孢子粉成分上的意義。
再進入分析之前，我們先將樣品放在顯微鏡下檢查一下，確認樣品中並無摻雜其他添加物（圖2）。圖2右側所顯示的靈芝孢子粉呈現完整雙層細胞壁的靈芝擔孢子，沒有其他雜質；圖2左側則為破壁孢子粉，很明顯看到絕大部分的孢子都已破裂，表示真的是破壁孢子粉。
圖2 顯微鏡下的靈芝孢子粉形態
右圖是未破壁的靈芝孢子，有完整的雙層細胞壁；
左圖是破壁的孢子粉，大部分的孢子都已破裂。（提供／蘇慶華）
我們選了幾個樣品，包括兩岸栽培的的靈芝子實體、大陸的孢子粉、破壁孢子粉，以及一些標準品。這些樣品先取定量（2.0 g），以甲醇萃取、濃縮後，用毛細管取2 ml點在TLC片上，再以展開液（甲醇：氯仿：水 比率為30：4：1）展開。分別以波長254 nm及366 nm之紫外光及10%硫酸加熱呈色，同一片TLC即可以得到三個圖譜（圖3）。
TLC上的二氧化矽是極性較高的物質，對極性高的靈芝成分會有較高的親和力，因此極性高的物質會移動較慢而留在下方；相對的，極性低的物質會被推到片子的上方而形成一條指紋。再利用不同物質對不同波長的吸收性，以及在強酸下呈現不同顏色，就可大致看出靈芝成分的比重。
圖3呈現的是靈芝成分與一些標準品之間的關係，從最下方開始讀起，就是極性最高的成分，包括腺苷和多醣。但如以甲醇萃取，一般不會萃取到這些物質，僅示意這些物質可能出現的位置。
再往上一點就是三萜出現的位置，其中包括兩個易於辨識的紅點，分別是靈芝酸B（GA B）及C2 （GA C2）。再往上方的固醇區（甾醇區），我們用兩個標準品來標示，一個是麥角固醇（麥角甾醇），另外一個是簡稱為ergone的多元不飽和固醇（多元不飽和甾醇），化學名很長叫(22E)-Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one，是靈芝常見的固醇。Ergone在硫酸呈色區不太明顯（淺綠色），但在366 nm波長紫外光下會發亮。這個圖也說明靈芝子實體成分的分布相當豐富，從極性最高到最低都完整具備。
接著，我們拿大陸的樣品進行比對，包括三種孢子粉和一種靈芝子實體。結果顯示（圖4），大陸栽培的靈芝子實體成分和臺灣栽培的靈芝子實體是幾乎一樣的，都含有靈芝酸B、靈芝酸C2和固醇，符合分類學家認為均屬同一種靈芝的說法。至於兩種未破壁孢子粉也有相同的模式，在三萜類這一區塊幾乎沒有呈色點，也符合我們過去的分析──三萜類很少或幾乎沒有──但是在固醇這一區則明顯呈現ergone及麥角固醇。
圖3 靈芝子實體與標準成分之TLC分析圖
此圖呈現的是靈芝子實體甲醇萃取物的成分與標準品之間的關係，
最下方是極性最高的成分，包括腺苷和多醣；
再往上一點就是三萜出現的位置，包括靈芝酸B和C（GA B和GA C），
再往上則是固醇區（甾醇區），包括麥角固醇和ergone。
顯然靈芝子實體成分的分布相當豐富，從極性最高到最低都完整具備。
（提供／蘇慶華）
圖4 靈芝子實體與孢子粉之TLC分析圖
從此圖譜可知，大陸和臺灣栽培的靈芝子實體的成分非常近似；
兩種未破壁孢子粉在三萜這一區塊幾乎沒有呈色點，表示三萜含量很少或幾乎沒有，
但在固醇這一區則明顯呈現ergone及麥角固醇；
破壁孢子粉在固醇區的反應則更明顯，顯示破壁有助活性成分的釋出。
（提供／蘇慶華）
子實體成分完整，孢子粉容易服用
以上的分析或許可以說明前面提到的兩個問題：第一，孢子粉不含或只有很少的三萜類，這樣的成分組成特性可能會犧牲掉一些保肝、抗過敏、降血脂、心血管保護等功能。不過，孢子粉含有較高的真菌固醇（麥角固醇、ergone），這些成分有其他功效嗎？
其實，張樹庭教授在此次演講裡也提到，麥角固醇對癌症抑制的作用已逐漸受到肯定。筆者的實驗室最近也證實，真菌固醇會改變癌細胞的形狀並減緩分裂速度，因此靈芝孢子粉做為癌症治療的輔助食品應該是有潛力的。此外，還有研究顯示ergone對腎臟功能的改善有明顯幫助，這也說明靈芝孢子粉有其保健價值。
雖然靈芝孢子粉的成分並不像子實體那麼完整，但大陸市場接受靈芝孢子粉的程度高於靈芝子實體的另外一個原因，可能是它易於服用。粉末狀的孢子粉可用開水喝下去，相對於子實體的堅韌性質，磨粉是不太容易的。
子實體切片很難直接口服；如果熱水浸泡，可能會溶出多醣和一部分三萜，但根據我們的經驗，真菌固醇是無法以此方法得到的。除非靈芝子實體經過完整提取各部分的成分，否則孢子粉在劑型上會占有一定的優勢，何況靈芝孢子粉的產率很高，更會使成本下降而成為靈芝商品的主流。
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